Metodika používaná při testech na korýších je ČSN EN ISO 6341, kterou se zjišťuje inhibice pohyblivosti perlooček. Cílem testu je zjištění vlivu vodou vyluhovatelných látek na mortalitu a imobilizaci (tj. makroskopicky pozorovatelná neschopnost samostatného prostorového pohybu) drobného korýše Daphnia magna STRAUS (viz obr. 1).

Požadované koncentrace se připraví ředěním testované látky ředící vodou. Před testem je vhodné vytemperovat vzorky na laboratorní teplotu. Asi 2 hodiny před testem se doporučuje odlovit mladé dafnie o stáří maximálně do 24 hodin (viz obr. 2) od vylíhnutí do nádobky s ředící vodou a nakrmit je kulturou chlorokokální řasy přidané v podobě několika kapek k roztoku. Do každé koncentrace se nasazuje po 10 až 60 kusech dafnií (požadavek 5 ml na jedince), stejným způsobem se nasadí i kontrola. Správnost přípravy pracovních roztoků a použití životaschopných jedinců limituje hranice maximálně 10 % mortality či imobilizace v kontrolním roztoku. Test probíhá po dobu 48 hodin, při teplotě 20 °C ± 2 °C, bez aerace, bez osvětlení a bez krmení perlooček. Během testu se zaznamenává chování (imobilizace) a úhyn perlooček za 24 hodin a 48 hodin. Zjištěné hodnoty I_i během 24 a 48 hodin se převedou na pravděpodobnostní (probitové) jednotky a tyto jednotky se spolu s odpovídajícími koncentracemi převedenými na logaritmy použijí pro sestrojení grafu, kde na ose x jsou logaritmy koncentrací a na ose y probitové jednotky. Lineární regresí se zjistí hodnota efektivní koncentrace _48hEC₅₀.

V současné době jsou chovy perlooček nahrazovány tzv. řízenou produkcí z jejich klidových stádií (tzv. ephipií (viz obr. 3)) při tzv. alternativních testech. V takovém případě probíhá líhnutí korýšů od 24 do 72 hodin od počátku inkubace.

 

---

Obr. 1: Samička korýše Daphnia magna STRAUS.

 

---

Obr. 2: Mladé stadium Daphnia magna o stáří maximálně do 24 h.

 

---

Obr. 3: Ephippium, tzv. zimní vajíčko Daphnia magna.

  Grafy souvislostí do úrovně:      I       II       III