Pracoviště a pomůcky v mikrobiologické laboratoři
|
|
Workplace, equipment and materials used in microbiological laboratory
|
Mikrobiologické pracoviště je určeno pouze pro provádění mikrobiologických analýz
a je nepřípustné, aby bylo využíváno pro jiné účely. Laboratoř je samostatnou místností,
ve které se provádí očkování kultur, kultivace naočkovaných médií a slouží k počítání
vyrostlých kolonií. Při práci s čistými kulturami se doporučuje očkovací box. (Čisté
kultury bakterií lze získat např. oživením želatinového disku (viz obr. 1), obsahujícího buňky
bakterií, dodávaného sbírkou mikroorganismů CCM Brno). Další místností je
varna kultivačních médií, kde se připravují kultivační média a reagencie pro mikrobiologické
rozbory. Na úseku mikrobiologie je velmi důležitým krokem sterilizace, a to jak
prostředí, tak pomůcek, skla a samotných médií. Prostor a ovzduší je nutné dezinfikovat
UV-zářením (UV lampa pracující v rozmezí 200 nm až 280 nm, optimum 260 nm), a to
před započetím práce i po jejím skončení, ale nikdy v přítomnosti pracovníků. Při
práci s médii a kulturami by měla být dokonale utěsněná okna i dveře.
Pro práci v mikrobiologické laboratoři se používají některé nezbytné pomůcky a zařízení:
-
Vzorkovnice jsou výhradně skleněné lahve o objemu 500 ml (popř. 200 ml)
se zabroušenou zátkou (hmatník musí přesahovat průměr hrdla).
-
Petriho misky o ⌀ 10 cm (popř. ⌀ 9 cm) mohou být skleněné či plastové.
V současné době se spíše používají pro úsporu práce plastové misky (viz obr. 2), které jsou
jednorázové a předem vysterilizované roztokem kyseliny octové.
- Dělené i nedělené skleněné pipety se používají pro aplikaci médií i
inokulaci vzorků (dle jednotlivých metod). Sterilizace pipet probíhá ve speciálních kovových pouzdrech (viz obr. 3), která se umisťují do příslušné sušárny. Pro zacházení s médii se
používají skleněné bakteriologické zkumavky, které nejsou tlustostěnné, kultivační
nádoby (Erlenmayerovy baňky), nádoby na přípravu a uchovávání médií.
- K inokulaci mikroorganismů na povrch média slouží bakteriologická klička (viz obr. 4)
z nikelnatého, chromnikelnatého či ocelového drátu silného 0,6 - 0,8 mm,
na konci s očkem o ⌀ 2 - 3 mm a délce kličky 5,5 - 6 cm. Klička je upevněna
druhým koncem v KOLLEHO držáku.
- Sterilizačním zařízením je např. autokláv (viz obr. 5) (teplotě 121 °C odpovídá přetlak 0,1 MPa),
horkovzdušný sterilizátor či horkovzdušná chemická sušárna pro sterilizaci skla a nádobí.
Ke sterilizaci očkovacích jehel, kliček, pinzet a filtrační aparatury (komínků, filtračních
podložek) se používá BUNSENŮV kahan s možností nastavení úsporného plamene.
- Dalšími pomůckami a zařízením je filtrační aparatura pro membránovou filtraci (viz obr. 6) s
vývěvou. Filtrační aparatura je kovová, složená většinou ze tří filtračních míst s
uchycenými komínky. Uvnitř těchto trychtýřovitých komínků jsou rysky označující objem 50 ml a 100 ml,
což usnadňuje aplikaci vzorku, kdy nemusíme používat odměrné nádoby.
Na jednotlivé kovové plošky filtrační aparatury se umisťují membránové filtry
Milipor s ⌀ pórů 0,45 µm (dle metody) a přichycují se trychtýřovitými komínky. Do
takto vzniklého prostoru se pak aplikuje požadovaný objem sledovaného vzorku,
spuštěním vývěvy se vzorek přefiltruje a kvantitativně se zachytí na povrchu
vysterilizovaného filtru.
|
Obr. 1: Želatinový disk bakteriální kultury v porovnání s měřítkem.
|
|
Obr. 2: Plastové jednorázové Petriho misky vysterilizované kyselinou peroctovou, používané v mikrobiologii ke zkouškám.
|
|
Obr. 3: Speciální kovová pouzdra používaná ke sterilizaci skleněných pipet v mikrobiologii.
|
|
Obr. 4: Bakteriologické kličky z chromnikelnatého drátu v Kolleho držáku.
|
|
Obr. 5: Autokláv.
|
|
Obr. 6: Filtrační aparatura používaná pro membránovou filtraci v mikrobiologii.
|
Grafy souvislostí do úrovně:
I
II
III