sekvenování DNA {4}

DNA sequencing

nejběžněji tzv. Sangerovou dideoxy-metodou. Při ní se využívá biosynthetické reakce, katalysované DNA-polymerasou. Do reakční směsi, obsahující sekvenovanou DNA, se vedle potřebných deoxyribonukleosidtrifosfátů (viz replikace) přidává malé množství určitého dideoxyribonukleosidtrifosfátu (např. ddGTP); pokud je ddGMP zařazen do řetězce, synthesa se ukončí. Vznikne tak řada různě dlouhých řetězců, které všechny končí ddGMP; tyto řetězce se rozdělí gelovou elektroforesou podle své molekulové hmotnosti. Pokus se provede pro všechny čtyři dideoxyribonukleotidy a pak je již snadné odečíst primární strukturu původního řetězce. Za příspěvek ke stanovení sekvence bází v nukleových kyselinách získali roku 1980 F.Sanger a W.Gilbert Nobelovu cenu.
  Grafy souvislostí do úrovně:      I graf      II graf

Citujte jako:  KODÍČEK, M. sekvenování DNA. From Biochemické pojmy : výkladový slovník [online]. Praha: VŠCHT Praha, 2007. Available from www: <http://vydavatelstvi.vscht.cz/knihy/uid_es-002/ebook.html?p=sekvenovani_dna>