angl. substrate dissociation constant, disociační konstanta
komplexu enzym–substrát. Substrát se váže do aktivního centra enzymu vratnou reakcí E + S ES. Substrátová konstanta KS je rovna poměru rovnovážných koncentrací (cEcS)/cES. V případě, že se tato rovnováha ustavuje rychle (kineticky řídícím dějem enzymové reakce je vznik produktu), je substrátová konstanta číselně rovna konstantě Michaelisově.