angl. hydrolyases, enzymy katalyzující odštěpení molekuly vody za vzniku dvojné vazby nebo naopak adici vody na dvojnou vazbu (EC 4.2.1.-). K důležitým reakcím tohoto typu patří např. přeměna 2-fosfoglycerátu na
fosfoenolpyruvát v glykolyse, enoyl-CoA na 3-hydroxyacyl-CoA při β-oxidaci mastných kyselin nebo adice vody na fumarát za vzniku L-malátu v citrátovém cyklu.