Mikrobiotesty
|
|
Microbiotests
|
Alternativní testy, mikrobiotesty, využívají k testování klidová stádia
testovacích organismů, tj. vajíčka, cysty, ephipia, tkáně, lyofilizované a
imobilizované kultury organismů. Testům se někdy říká miniaturizované testy (viz obr. 1),
což je dáno minimálním množstvím objemů potřebných pro testování, minimálním
požadavkem na laboratorní prostory a vybavení. Malou spotřebou testovaných
roztoků umožňují provedení více paralelních testů, alternaci při vyhodnocování
a v případě potřeby i opakování testu. Díky řízení produkce testovacích
organismů z jejich klidových stádií (cyst a ephipií), imobilizovaných kultur
řas a lyofilizovaných kultur bakterií lze provádět testy na zakázku. Líhnutí
testovacích organismů a příprava kultur záleží na typu organismu, např.
líhnutí vířníků z cysty probíhá maximálně 24 hodin, líhnutí korýšů trvá od
24 do 72 hodin od počátku inkubace.
Nejpoužívanějšími bateriemi testů jsou: Rototoxkit (vířník
Brachionus calyciflorus (viz obr. 2)),
Thamnotoxkit (korýš
Thamnocephalus platyurus (viz obr. 3a–b)),
Daphtoxkit (korýš
Daphnia pulex (viz obr. 4),
Daphnia magna (viz obr. 5)), Algaltoxkit
(řasa Selenastrum capricornutum (viz obr. 6a–b), syn. Raphidocelis subcapitata).
Testy toxicity prodělaly značný rozvoj od svého zavedení do
praxe až po současnost. Markantní postup ve vývoji je patrný na
řasových testech toxicity od základního testu až po jeho modifikace.
Tento test byl postupně modifikován nahrazením kultivačních baněk
plastovými zkumavkami o objemu 2,5 ml. V Třeboni v Botanickém ústavu
se vývojem modifikací zabývá J. LUKAVSKÝ, který do praxe zavedl
kultivaci v sérologických destičkách očkováním řas na agar v jamkách.
Agar byl později nahrazen tekutou suspenzí. Využití imobilizované
kultury řas se stalo podnětem pro zavedení algaltoxkitu do praxe.
Imobilizace spočívá ve vazbě živých buněk do permeabilního gelu (alginát,
agar, polyakrylamid) nebo na povrch vhodného nosiče (iontoměnič,
balotina). Imobilizace zastaví růst a dělení buněk, metabolická aktivita
buněk pokračuje dál.
 |
Obr. 1: Tzv. miniaturizovaný test akutního testu toxicity, typ Daphtoxkit.
|
 |
Obr. 2: Druh vířníka Brachionus calyciflorus používaný v miniaturizovaných testech toxicity.
|
 |
Obr. 3a: Druh korýše Thamnocephalus platyurus používaný v miniaturizovaných testech toxicity.
|
 |
Obr. 3b: Jeden z instarů korýše Thamnocephalus platyurus.
|
 |
Obr. 4: Druh korýše Daphnia pulex používaný v testech toxicity.
|
 |
Obr. 5: Druh korýše Daphnia magna používaný v testech toxicity.
|
 |
Obr. 6a: Chlorokokální řasa rodu Selenastrum používaná v testech toxicity.
|
 |
Obr. 6b: Chlorokokální řasa rodu Selenastrum používaná v testech toxicity.
|
Grafy souvislostí do úrovně:
I 
II 
III 