Metoda 1: Horký peroxid vodíku
|
|
Method 1: Hot hydrogen
peroxide
|
Vzorek se protřepáním zhomogenizuje a 5 ml až 10 ml suspenze se přenese do
kádinky nebo varné zkumavky. Přidá se přibližně 20 ml peroxidu vodíku (koncentrovaný,
30%) a zahřívá se na varné plotýnce, pískové nebo vodní lázni při teplotě (90 ± 5) °C,
dokud veškerý organický materiál nezoxiduje (obvykle 1 h až 3 h). Zbytky rostlinného
materiálu makrofyt ve vzorku mohou být odstraněny po 30 min. Při přilévání chladného
koncentrovaného roztoku peroxidu vodíku k organickému materiálu a vodním rostlinám
a během zahřívání je nutné dbát zvýšené opatrnosti. Kádinka nebo varná zkumavka se
stáhne z horka. Přidá se několik kapek kyseliny chlorovodíkové (např. 1 mol·l-1), aby
se odstranil zbývající peroxid vodíku a uhličitany. Pak se stěny kádinky opláchnou
destilovanou nebo demineralizovanou vodou a kádinka se nechá vychladnout v digestoři.
(V případě vzorku, u kterého je přítomnost uhličitanů nepravděpodobná, lze přidávání
kyseliny chlorovodíkové vynechat.) Obsah kádinky nebo varné zkumavky se přenese do
centrifugační zkumavky, doplní se destilovanou nebo demineralizovanou vodou a odstředí
se (nebo se nechá stát). Supernatant se slije, k sedimentu se přidá destilovaná nebo
demineralizovaná voda a odstřeďování se opakuje. Promývání by se mělo opakovat alespoň
třikrát, nebo tak dlouho, dokud není veškerý peroxid vodíku odstraněn. Když jsou stopy
peroxidu vodíku a kyseliny chlorovodíkové odstraněny, promíchá se rozsivkový sediment s
malým množstvím destilované nebo demineralizované vody a přenese se do malé ampulky.
Přidá se několik kapek 4% formaldehydu (formalinu), peroxidu vodíku nebo ethanolu,
aby se zabránilo růstu hub. Pak může být vzorek uchován po neomezeně dlouhou dobu.
Grafy souvislostí do úrovně:
I
II
III